Обаятельный итальяно-американский сантехник из Бруклина, едва зарабатывающий на жизнь своей работой, случайно оказывается в грибном королевстве и пытается спасти своего брата Луиджи.

Трусливый и робкий брат Марио, который, однако, очень добросердечен и всегда поддерживает его. Попав в лапы Боузера, он становится главной мишенью анимационного фильма.

Верный и храбрый подданный и управляющий принцессы Пич, который ведет Марио в королевство Боузера.

Правитель Темного Королевства, огнедышащий король Купа который крадет сверхмощную Суперзвезду, чтобы захватить принцессу Пич и Грибное королевство.

Принц обезьян, наследник престола королевства джунглей, который после поражения в битве с Марио неохотно присоединяется к водопроводчику в его миссии по победе над Боузером.